Differentiation of human labia minora dermis-derived fibroblasts into insulin-producing cells

Recent evidence has suggested that human skin fibroblasts may represent a novel source of therapeutic stem cells. In this study, we report a 3-stage method to induce the differentiation of skin fibroblasts into insulin-producing cells (IPCs). In stage 1, we establish the isolation, expansion and characterization of mesenchymal stem cells from human labia minora dermis-derived fibroblasts (hLMDFs) (stage 1: MSC expansion). hLMDFs express the typical mesenchymal stem cell marker proteins and can differentiate into adipocytes, osteoblasts, chondrocytes or muscle cells. In stage 2, DMEM/F12 serum-free medium with ITS mix (insulin, transferrin, and selenite) is used to induce differentiation of hLMDFs into endoderm-like cells, as determined by the expression of the endoderm markers Sox17, Foxa2, and PDX1 (stage 2: mesenchymal-endoderm transition). In stage 3, cells in the mesenchymal-endoderm transition stage are treated with nicotinamide in order to further differentiate into self-assembled, 3-dimensional islet cell-like clusters that express multiple genes related to pancreatic beta-cell development and function (stage 3: IPC). We also found that the transplantation of IPCs can normalize blood glucose levels and rescue glucose homeostasis in streptozotocin-induced diabetic mice. These results indicate that hLMDFs have the capacity to differentiate into functionally competent IPCs and represent a potential cell-based treatment for diabetes mellitus.

Relevancia de la apoptosis en la reproducción femenina / Relevance of apoptosis in the female reproductive system

La apoptosis es un proceso genéticamente controlado mediante el cual las células inducen su propia muerte. Mensualmente y en forma cíclica, el ovario, el endometrio y la glándula mamaria atraviesan por ciclos de proliferación celular y apoptosis respondiendo a los cambios en la secreción hormonal. Durante el desarrollo embrionario, la apoptosis está implicada en procesos relacionados con la escultura de los diferentes órganos, a través de la eliminación de estructuras innecesarias y con el control de las células defectuosas. Asimismo, la apoptosis juega un papel fundamental en la función ovárica. La reserva folicular se establece durante la vida fetal y luego se va eliminando gradualmente. La apoptosis está involucrada tanto en la muerte celular durante el proceso de reclutamiento del folículo dominante, como en la luteólisis. Durante la pubertad la apoptosis contribuye a la formación del espacio luminal de los ductos terminales de la mama. A su vez, el proceso de involución mamaria luego de la lactancia se caracteriza por una apoptosis masiva de las células epiteliales secretoras. Así como la apoptosis está involucrada en los cambios fisiológicos que ocurren a nivel endometrial, también se ha asociado a la muerte celular programada con procesos patológicos, especialmente en aquellos caracterizados por el incremento en el crecimiento celular como es el caso de la endometriosis. El delicado balance entre la apoptosis y la proliferación celular es fundamental ya que permite que los tejidos puedan responder en forma cíclica a los cambios hormonales fisiológicos y prevenir procesos de transformación neoplásica.

Apoptosis is a genetically controlled form of cell suicide. Due to the cyclic nature of the female reproductive system, the ovary, the endometrium and the mammary gland sustain continuous cycles of cell growth and apoptosis in response to hormonal changes. Apoptotic cell death plays multiple roles during embryonic and organ development. It is involved in sculpturing tissues and serves to delete structures that are no longer required. It is clear that apoptosis plays an active and important role in ovarian physiological functions. Apoptosis plays a major role during folliculogenesis and dominant follicle selection and also plays part in corpus luteum regression. In addition, it has been shown that programmed cell death plays important roles in the mammary gland development and ductal morphogenesis. During puberty, lumen formation is associated with the selective apoptosis of centrally located cells. In turn, postlactational involution of the mammary gland is characterized by the secretory epithelial cells undergoing programmed cell death. Apoptosis has also been associated with physiological, as well as pathological, endometrial processes such as cancer and endometriosis. The delicate balance between apoptosis and cell proliferation is essential in controlling the cyclical growth of the reproductive tissues and plays an important role in the prevention of neoplastic transformation.

Análise bioquímica dos líquidos fetais e citologia do fluido amniótico da fêmea de Mocó (Kerodon rupestris) / Biochemical analysis of fetal fluids and cytology of the amniotic fluid of female Mocó (Kerodon rupestris)

Foram utilizados 10 sistemas genitais femininos de mocós (Kerodon rupestris) para estabelecer parâmetros de referência relativos à osmolaridade, pH, cálcio, fósforo, uréia, creatinina, glicose e proteínas totais. Os animais foram criados em cativeiro no CEMAS (Centro de Criação de Animais Silvestres), Mossoró - RN. As fêmeas estavam da metade (30-45 dias) para o final da gestação (65-70 dias). As bolsas amnióticas e alantoideanas foram puncionadas individualmente para colheita dos líquidos fetais, que foram centrifugados e analisados posteriormente. Para o líquido amniótico, as concentrações médias em mg/dl foram: glicose = 45,87 ± 22,38; cálcio = 6,31 ± 1,24; fósforo = 1,64 ± 0,72; creatinina = 0,45 ± 0,12; uréia = 34,03 ± 5,96; proteínas totais = 31,24 ± 16,67. Para o líquido alantoideano, as concentrações médias em mg/dl foram: glicose = 59,17 ± 10,85; cálcio = 5,58 ± 0,59; fósforo = 1,27 ± 0,73; creatinina = 0,38 ± 0,38; uréia = 31,49 ± 2,28; proteínas totais = 30,70 ± 18,39. Foram observadas pequenas oscilações entre as concentrações dos parâmetros bioquímicos do fluido amniótico e alantoideano. Estas concentrações são determinadas, provavelmente, pela atividade metabólica materno-fetal. A análise das células do fluido amniótico revelou quatro tipos celulares.

Evidencias inmunocitoquímicas sobre la presencia de la serpina CBG-símil en el sistema reproductor de la hembra en bovinos / Inmunocytochemistry evidence on the presence of the serpina CBG-like in the reproductive system of the female bovine

La reacción acrosomal es un proceso esencial para la fecundación en mamíferos. Recientemente, ha sido demostrado que la globulina que une corticoides (CBG), asociada a progesterona, induce la reacción acrosómica en niveles fisiológicos, in vitro. En la búsqueda de un componente morfológico in situ, utilizando rastreo inmunocitoquímico, nuestro grupo ha demostrado su presencia en células secretoras de ciertas regiones del sistema reproductor femenino humano. Si esta molécula, a travéz de la reacción acrosomal, esta involucrada en los mecanismos que llevan finalmente a la fecundación en humanos, parece razonable suponer que tiene una participación similar en otras especies mamíferas con procesos reproductivos básicamente comparables. El objetivo del presente trabajo fue determinar, a travéz de la inmunocitoquímica (ICQ), la presencia y distribución de la CBG-símil en el sistema reproductor de bovinos hembras, en los distintos estadios del ciclo reproductivo. Muestras de ovarios, útero, tuba uterinay células epiteliales tubáricas en cultivo fueron procesadas para la ICQ. Para ello, se utilizaron anticuerpos policionales contra CBG humana (comercial y otro producto de laboratorio) capaz de reconocer determinantes antigénicos comunes. La ICQ demostró, a nivel ovárico una reacción positiva preferentemente en células de folículos en estadios superiores de desarrollo. A nivel de la tuba uterina la inmunotinción se presentó claramente en células no ciliadas del epitelio tubárico. En el endometrio la reacción se concentró en las células epiteliales de las glándulas endometriales, sin observarse inmunorreacción a nivel estromal. La inmunotinción fue muy intensa en los períodos de mayor actividad estrogénica para, prácticamente, desaparecer en vacas preñadas. Las células de cultivo oviductales revelaron una población con reacción intensamente positiva y otra claramente negativa. Nuestros resultados nos permiten sugerir que el bovino existe la presencia de CBG-símil, la cual se distribuye en áreas morfológicas similares a las observadas en humano, y su concentración depende del ciclo ovárico. Tales elementos permitirían sugerir que esta particular molécula juega un rol similar en la especie bovina

Estudo microbiológico e citológico do trato genital de éguas / Microbiological and cytological study of the genital tract of mares

Estudou-se a flora microbiana de 810 amostras de "swabs" colhidos do trato genital de éguas de diferentes raças, com idades entre seis e 13 anos, durante o período de estro, e a citologia de esfregaços de secreçäo endometrial e a sensibilidade dos microrganismos isolados, frente a diferentes drogas antimicrobianas. Dos cultivos bacterianos realizados, 445 (54,9 por cento) foram isolados um ou mais microrganismos. Os mais frequente foram: Streptococcus sp (S. zooepidemicus 24,9 por cento, S. equisimilis 6,1 por cento, S. faecalis 5,6 por cento e S. equi 4,0 por cento), Staphylococcus sp (S. aureus 13,9 por cento, S. epidermidis 6,5 por cento e S. intermedius 3,1 por cento), Escherichia coli (E. coli näo hemolítica 8,5 por cento e E. coli beta hemolítica 3,8 por cento), Rhodococcus equi 7,4 por cento, Klebsiella pneumoniae 3,8 por cento, Candida albicans 3,4 por cento, Acinetobacter calcoaceticus 2,5 por cento, Pseudomonas aeruginosa 2,2 por cento, Proteus mirabilis 1,8 por cento, Alcaligines faecalis 1,6 por cento, Nocardia asteroides 0,7 por cento e Pasteurella hemolytica 0,4 por cento. A associaçäo entre os resultados obtidos nos exames microbiológicos e citológicos revelou x2 = 280,128 (P<0,001) e coeficiente de associaçäo significativa Psi = 0,59, concluindo-se que existe associaçäo significativa entre os dois tipos de exames. Segundo os antibiogramas, as drogas que melhor agiram sobre a maioria dos microrganismos foram cloranfenicol e gentamicina

Levantamento de patologias ginecológicas num asilo de Santa Maria / Survey of gynecological diseases in a asylum of Santa Maria

Os autores analisaram a incidência de patologias ginecológicas da populaçäo feminina de um asilo localizado na periferia de Santa Maria - Lar das vovózinhas. Foram entrevistadas 200 pacientes de um total de 240 e examinadas 71. Coletou-se Citologia Oncótica em 68 pacientes e foram realizados 6 exames colposcópicos. Ao exame constatou-se a presença de nódulo mamário e 6 pacientes, sendo que em 6, Cistorretocele em 5, Colpocistocele em 2, Colporretocele em 2 e Prolapso Genital em 1 paciente. Näo foi encontrada nenhuma alteraçäo displásica ao exame citológico de raspado vaginal e ectocervical

Anticoncepcional injetável: modificaçöes nucleares após o uso / Injectable contraceptive: nuclear modifications after use

Foi estudada a açäo contraceptiva hormonal injetável do acetato de medroxiprogesterona-ciprionato de estradiol (MPACE) em órgäos genitais de ratas. As ratas foram divividas em 2 grupos: A e B, respectivamente castradas e näo castradas e, de acordo com o número de doses, subdivididas em 6 subgrupos: A0, A1, A2, A3, A4, A5 e B0, B1, B2, B3, B4 e B5. Foram feitos estudos cariométricos dos núcleos do epitélio de revestimento da túnica mucosa uterina, das glândulas endometriais, miométrio e do epitélio da ectocérvix e da vagina. De cada subgrupo foram selecionadas três ratas e foram analisadas três lâminas para cada uma, em um total de nove observaçöes para cada subgrupo. Foram medidos 20 núcleos em cada lâmina, perfazendo um total de 60 núcleos, quando se tratava de epitélio de revestimento do endométrio, das glândulas endometriais e do miométrio, e um total de 120 núcleos nos casos de epitélio do exocérvix e da vagina, por se tratarem os mesmos de epitélios estratificados. Foram medidos um total de 15.120 núcleos e os resultados submetidos a tratamento estatístico. Observou-se aumento de volume nuclear quase duplicado das ratas na fase estro em relaçäo às castradas-controles. Por outro lado, a maior significância do efeito do MPACE foi encontrada em relaçäo às células do epitélio da túnica mucosa uterina, glândulas endometriais e miométrio. A açäo MPACE nas células da exocérvix e vagina näo foi significante. A análise estatística dos resultados demonstrou que com a associaçäo empregada neste trabalho houve predominância da açäo dos efeitos da fraçäo estrogênica, com aumento do volume nuclear; porém essa açäo foi contrabalançada pela fraçäo progestagênica, pois foram raras as mitoses